| 产谷氨酰胺转胺酶菌株的高通量筛选 |
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| 引用本文： | 刘 颖,田沛霖,陈 佳.产谷氨酰胺转胺酶菌株的高通量筛选[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(6):167-172. |
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| 作者姓名： | 刘 颖 田沛霖 陈 佳 |
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| 作者单位： | 华东师范大学 生命科学学院;华东师范大学 生命科学学院;华东师范大学 生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目“IL-17A调节REG3A促进伤口愈合的作用机理”(81072422) |
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| 摘 要： | 【目的】用醋酸纤维素膜和96孔板2种方法高通量筛选高产谷氨酰胺转胺酶(MTG)的茂原轮枝链霉菌菌株。【方法】利用紫外诱变获得茂原轮枝链霉菌突变体库后,分别利用醋酸纤维素膜和96孔板2种方法高通量初筛产MTG菌株,然后依次用试管和摇瓶发酵法复筛,并对96孔板高通量筛选方法的条件进行了优化。【结果】利用醋酸纤维素膜显色法从3 000株紫外诱变的菌株中筛选出1株高产MTG茂原轮枝链霉菌,其MTG活性为4.9U/mL,较出发株(MTG活性2.7U/mL)提高了80%。优化的96孔板高通量筛选方法为:直径为3mm左右的单菌落接种至150μL发酵培养基中,30℃200r/min培养72h;利用该法从3 415株紫外诱变的菌株中筛选获得了2株MTG高产株,其MTG活性为5.4U/mL,较出发株(MTG活性为3.0U/mL)提高了80%。【结论】利用基于醋酸纤维素膜和96孔板的2种高通量筛选方法分别筛选到1株和2株高产MTG的茂原轮枝链霉菌;相较传统的选育方法,这2种高通量筛选方法都大大降低了经济成本,提高了筛选效率,缩短了选育周期。
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| 关 键 词： | 茂原轮枝链霉菌 微生物谷氨酰胺转胺酶 高通量筛选 醋酸纤维素膜 96孔板 |
| 收稿时间： | 2012/8/27 0:00:00 |
Novel high-throughput screening of Streptoverticillium mobaraense with high microbial transglutaminase yield |
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| LIU Ying,TIAN Pei-lin,CHEN Jia,GAO Hong-liang,LU Wei,LU Xin-an,CHANG Zhong-yi,JIN Ming-fei.Novel high-throughput screening of Streptoverticillium mobaraense with high microbial transglutaminase yield[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(6):167-172. |
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| Authors: | LIU Ying TIAN Pei-lin CHEN Jia GAO Hong-liang LU Wei LU Xin-an CHANG Zhong-yi JIN Ming-fei |
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| Institution: | 1(1 School of Life Science,East China Normal University,Shanghai 200241,China; 2 Taixing Dongsheng Food Science & Technology Co.,Ltd,Taixing,Jiangsu 225441,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Streptoverticillium mobaraense microbial transglutaminase(MTG) high-throughput screening(HTS) cellulose acetate film(CAF) 96-well microtiter plate |
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