| 潮霉素磷酸转移酶的原核表达纯化及其抗体制备 |
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| 引用本文： | 许文涛.潮霉素磷酸转移酶的原核表达纯化及其抗体制备[J].农业生物技术学报,2008,16(4). |
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| 作者姓名： | 许文涛 |
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| 作者单位： | 中国农业大学食品科学与营养工程学院食品生物技术系
农业部转基因食品检验监督测试中心
农业部农产品检验监督测试中心 |
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| 摘 要： | 本研究从转基因玉米基因组上成功克隆出潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)，通过BamHⅠ和Hind III 双酶切作用，将hpt基因与pET30a进行粘性末端连接成功构建pET30a-hpt质粒，并转化到大肠杆菌BL21中进行蛋白表达。在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导下，pET30a-hpt融合表达载体在大肠杆菌BL21(DE3) 菌株中以可溶性蛋白的形式高效表达了潮霉素磷酸转移酶（HPT），并通过金属鏊和层析纯化了目的蛋白。用肠激酶切除了融合蛋白的融合部分之后再一次通过金属鏊和层析，经过透析后获得了HPT纯品,并且使用纯化的HPT蛋白免疫兔子制备了特异性强的多克隆抗体。
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| 关 键 词： | hpt基因 潮霉素磷酸转移酶 表达纯化 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2007-10-22 |
| 修稿时间： | 2007-12-18 |
Expression and Purification of HPT gene in Escherichia coli and Preparation of Its Polyclonal Antibodies |
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