天祝白牦牛Y染色体性别决定基因(SRY)编码区的克隆和原核表达 |
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引用本文: | 裴杰,朱新书,阎萍,厍睿,程胜利,冯瑞林,梁春年,郭宪,曾玉峰,包鹏甲.天祝白牦牛Y染色体性别决定基因(SRY)编码区的克隆和原核表达[J].农业生物技术学报,2009,17(4). |
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作者姓名: | 裴杰 朱新书 阎萍 厍睿 程胜利 冯瑞林 梁春年 郭宪 曾玉峰 包鹏甲 |
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作者单位: | 裴杰,朱新书,阎萍,程胜利,冯瑞林,梁春年,郭宪,曾玉峰,包鹏甲(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,兰州,730050);厍睿(西北民族大学生命科学与工程学院,兰州,730030) |
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基金项目: | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目 |
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摘 要: | 从天祝白牦牛(Bos grunneins)的基因组DNA中扩增了Y染色体性别决定基N(SRY)编码区序列,将其克隆至pGEM-T easy载体,天祝白牦牛SRY基因编码区长687 bp,编码229个氨基酸(GenBank:FJ373272);对牦牛和奶牛(B.grunneins)的SRY基因编码区进行序列比对,发现存在2个碱基的变异,造成1个氨基酸的变异;将牦牛SRY基因编码区连接至pET-28a(+)载体,成功地构建了表达载体pET-28a/SRY;把表达载体pET-28a/SRY转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用IPTG在30℃ 200 r/min条件下诱导,获得了SRY蛋白的大量表达;对表达产物进行Western blot检测,结果显示获得的蛋白能与抗-His单抗特异性结合,确定了牦牛SRY蛋白的表达.
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关 键 词: | 牦牛 Y染色体性别决定基因(SRY) 克隆 表达 |
Cloning of the Encoding Region of Sex-determining Region on Y Chromosome Gene (SRY) in Tianzhu White Yak and Its Prokaryotic Expression |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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