| 梅花鹿IFN-β1的原核表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 苏凤艳,李哲,刘存发,宗颖,曾范利,王全凯.梅花鹿IFN-β1的原核表达及活性鉴定[J].中国预防兽医学报,2015(2):136-139. |
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| 作者姓名： | 苏凤艳 李哲 刘存发 宗颖 曾范利 王全凯 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学中药材学院;吉林省野生动物救护繁育中心;吉林省中韩动物科学研究院 |
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| 基金项目： | 吉林省自然科学基金(201115194);国家国际科技合作专项(2011DFA32900) |
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| 摘 要： | 为表达具有抗病毒活性的梅花鹿干扰素β1(IFN-β1),本研究通过PCR扩增梅花鹿IFN-β1基因,将其克隆至原核表达载体p ET-28a中,构建重组质粒p ET-IFNβ1,并将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后,得到高效表达。SDS-PAGE与western blot分析结果表明,梅花鹿IFN-β1重组蛋白的分子量大小约为24 ku,表达产物主要为不溶性的包涵体,表达量占菌体总蛋白的59.02%。将Ni柱纯化的p ET-IFNβ1诱导表达产物复性后,细胞病变抑制法检测表明表达产物具有抗病毒活性,其抗病毒活性可以达到10×53.81U/0.1 m L。梅花鹿INF-β1的表达为梅花鹿INF-β1的应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 梅花鹿 IFN-β1基因 原核表达 活性鉴定 |
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