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蟠桃磷脂酶D基因RNAi表达载体构建
引用本文:史元敏,何天明,袁海英.蟠桃磷脂酶D基因RNAi表达载体构建[J].新疆农业科学,2012,49(8):1408-1413.
作者姓名:史元敏  何天明  袁海英
作者单位:新疆农业大学林学与园艺学院,乌鲁木齐,830052
基金项目:国家自然科学基金(30860171);霍英东教育基金项目(121109)
摘    要:目的]构建蟠桃磷脂酶D基因的RNAi表达载体.方法]以英格尔蟠桃为材料,将CTAB改良法提取的蟠桃总RNA反转录成cDNA作为模板,通过RT - PCR扩增约347 bp的保守片段,将目标片段插入到pSK - int中间表达载体中,获得pSK - PLD - RNAi中间表达载体,然后将其转入植物双元表达载体pCAMBI1301中,构建该基因的shRNAi表达载体pCAMBIA - PLD - RNAi.结果]经限制性内切酶酶切和测序鉴定证明蟠桃磷脂酶D基因的RNAi表达载体pCAMBIA - PLD - RNAi已构建成功.结论]蟠桃磷脂酶D基因的RNAi表达载体的构建为进一步通过RNAi技术延长蟠桃果实的贮藏寿命奠定了基础.

关 键 词:蟠桃  磷脂酶D  RNA干扰  载体构建
收稿时间:2012-08-25

Construction of Phospholipase D RNAi Vector of Flat Peach Fruit
SHI Yuan-min , HE Tian-ming , YUAN Hai-ying.Construction of Phospholipase D RNAi Vector of Flat Peach Fruit[J].Xinjiang Agricultural Sciences,2012,49(8):1408-1413.
Authors:SHI Yuan-min  HE Tian-ming  YUAN Hai-ying
Institution:(College of Forestry and Horticulture,Xinjiang Agricultural University,Urumqi 830052,China)
Abstract:
Keywords:Flat Peach  Phospholipase D  RNA interference  vector construction
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