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猪细环病毒数字PCR定量检测方法的建立
引用本文:杨春华,孙洁,罗秋红,祝建新,孙思扬,周延,钟毅,夏彪.猪细环病毒数字PCR定量检测方法的建立[J].中国动物检疫,2017,34(4):80-85.
作者姓名:杨春华  孙洁  罗秋红  祝建新  孙思扬  周延  钟毅  夏彪
基金项目:江西省科技计划项目(20151BBF60048)
摘    要:目的]实现猪细环病毒(TTSuV)的准确定量检测。方法 ]根据TTSuV的序列特点,设计特异性引物、探针,建立数字PCR检测技术。对数字PCR反应体系中的引物和探针浓度进行优化,分析方法的灵敏度、特异性,并初步应用于进行临床检测。结果 ]最终确定TTSuV1a和TTSuV1b数字PCR反应体系中最佳引物浓度均为250 nmol/L,最佳探针浓度均为300 nmol/L,TTSuV1a型和TTSuV1b型灵敏度均可达到单个拷贝数;以猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,结果无交叉反应;批内和批间试验表明,该方法的重复性良好;本实验室留存的92份血清样本的检测结果与其背景信息一致。结论 ]本研究建立的TTSuV数字PCR法具有特异性强、灵敏度高、检测限低等优点,可用于TTSuV的定量检测。

关 键 词:猪细环病毒  实时荧光PCR  数字PCR

Development of a Digital PCR Assay for Quantitative Detection of Torque Teno Sus Virus
ang Chunhu,Sun Jie,Luo Qiuhong,Zhu Jianxin,Sun Siyang,Zhou Yan,Zhong Yi,Xia Biao.Development of a Digital PCR Assay for Quantitative Detection of Torque Teno Sus Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2017,34(4):80-85.
Authors:ang Chunhu  Sun Jie  Luo Qiuhong  Zhu Jianxin  Sun Siyang  Zhou Yan  Zhong Yi  Xia Biao
Abstract:
Keywords:
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