| 用PCR技术从同一兔出血症病料扩增和检出2种病毒核酸 |
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| 引用本文： | 张英,杜念兴.用PCR技术从同一兔出血症病料扩增和检出2种病毒核酸[J].中国兽医学报,1999(4). |
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| 作者姓名： | 张英 杜念兴 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院!南京210095 |
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| 摘 要： | 应用 Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 技术，对兔出血症病毒核酸作了鉴定。分别设计合成 ２ 对 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增特异性引物，即按兔出血症病毒中国分离的 Ｎ Ｊ株核酸序列合成 １ 对引物（ Ｎ Ｊ引物），按德国分离的 Ｆ Ｒ Ｇ 株核酸序列合成另 １ 对引物（ Ｆ Ｒ Ｇ 引物），进行 Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ。从纯化的病毒核酸样品和感染 Ｄ Ｊ Ｒ Ｋ 细胞的病毒核酸样品中，均扩增出 ２ 对引物范围内的特异性核酸片段， Ｎ Ｊ引物扩增产物为 ３６４ ｂｐ， Ｆ Ｒ Ｇ 引物扩增产物为 ５１３ｂｐ。模板用 Ｒ Ｎａｓｅ 消化后，仍出现 ３６４ ｂｐ 带，用 Ｄ Ｎａｓｅ Ｓ１ 消化，则此带消失；反之，用 Ｄ Ｎａｓｅ Ｓ１ 消化，出现５１３ ｂｐ 带，用 Ｒ Ｎａｓｅ 消化，则此带消失，证实前者模板为 Ｄ Ｎ Ａ，后者为 Ｒ Ｎ Ａ。 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交试验证实， Ｐ Ｃ Ｒ扩增出的核酸片段与各自的地高辛标记特异性探针发生强阳性杂交反应。由此认为，在兔出血症病毒感染中，同时存在着 ２ 种不同核酸型的病毒。
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| 关 键 词： | 聚合酶链反应 兔出血症病毒 Southern杂交 |
Amplification and Detection of Two Nucleic Acids of Rabbit Haemorrhagic Disease Virus by PCR from the Same Samples |
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| Zhang Ying,Du Nianxing.Amplification and Detection of Two Nucleic Acids of Rabbit Haemorrhagic Disease Virus by PCR from the Same Samples[J].Chinese Journal of Veterinary Science,1999(4). |
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| Authors: | Zhang Ying Du Nianxing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | polymerase chain reaction rabbit haemorrhagic disease virus Southern blot hybridization |
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