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百脉根农杆菌快速高效遗传转化体系的建立
引用本文:刘建利,张占路,吴燕民,唐益雄,郭蔼光,陈两桂.百脉根农杆菌快速高效遗传转化体系的建立[J].草业学报,2006,15(3):128-131.
作者姓名:刘建利  张占路  吴燕民  唐益雄  郭蔼光  陈两桂
作者单位:1. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081;西北农林科技大学生命科学院,陕西,杨凌712100;西北第二民族学院生命科学系,宁夏,银川,750021
2. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083
3. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081
4. 西北农林科技大学生命科学院,陕西,杨凌712100
5. 深圳市农科集团,广东,深圳,518040
基金项目:深圳市科技局基金项目资助
摘    要:以百脉根品种“里奥”作为受体材料,以GUS基因为报告基因,研究了影响农杆菌介导的百脉根遗传转化的几种因素及表面活性剂(PEG 4000)、真空处理和乙酰丁香酮对提高转化效率的影响,建立了农杆菌介导的百脉根快速高效遗传转化体系,并获得了转基因抗性苗。结果表明,以子叶(带叶柄)为外植体,在OD600为0.5的菌液中,加入150 mg/L的PEG 4000,真空度6×10-2Pa,抽真空12 min,共培养3 d,转入含卡那霉素50 mg/L和羧苄青霉素300 mg/L的分化培养基中,约20 d后,50%的外植体分化不定芽,生根成苗。PCR初步检测表明有83%的植株为GUS阳性,转化率约为42%。

关 键 词:百脉根  遗传转化  根癌农杆菌  GUS基因
文章编号:1004-5759(2006)03-0128-04
收稿时间:2005-04-08
修稿时间:2005年4月8日

Establishment of an efficient Agrobacterium-mediated genetic transformation system of Lotus corniculatus
LIU Jian-li,ZHANG Zhan-lu,WU Yan-min,TANG Yi-xiong,GUO Ai-guang,CHEN Liang-gui.Establishment of an efficient Agrobacterium-mediated genetic transformation system of Lotus corniculatus[J].Acta Prataculturae Sinica,2006,15(3):128-131.
Authors:LIU Jian-li  ZHANG Zhan-lu  WU Yan-min  TANG Yi-xiong  GUO Ai-guang  CHEN Liang-gui
Abstract:
Keywords:Lotus corniculatus  genetic transformation  Agrobacterium tumefaciens  GUS gene
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