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苎麻咖啡酰辅酶A甲基转移酶基因原核表达及其结构分析
作者姓名:陈建荣  郭清泉  张学文  陈金军
作者单位:长沙学院生物工程与环境科学系,湖南农业大学生物科学技术学院
基金项目:国家自然科学基金项目"苎麻木质素代谢调控基因功能分析及遗传表达研究" ?
摘    要:为了研究苎麻木质素合成关键酶——咖啡酰辅酶A-甲基转移酶(CCoAOMT)基因编码的酶蛋白,了解其结构特点;采用原核表达系统——大肠杆菌表达系统pQE,对苎麻CCoAOMT cDNA编码区进行了高效表达,获得了分子量为29.4kD的苎麻CCoAOMT融合蛋白。采用SwissModel服务器模拟构建了该酶蛋白的空间结构。并利用InsightII软件包中的Docking模块构建了该酶蛋白与辅酶Sinapoyl、SAH和Ca2 相互作用的复合物的结合模型,并利用Discover模块对模拟的结构进行结构优化。可以推知所克隆的苎麻CCoAOMT cDNA编码了咖啡酰辅酶A甲基转移酶,具有O-甲基转移酶蛋白典型的催化功能,参与苎麻木质素单体前体的甲基化反应。

关 键 词:苎麻(Boehmeria  nivea)  木质素  咖啡酰辅酶A甲基转移酶  原核表达

High-level Expression Ramie Caffeoyl-CoA 3-O-methyltransferase Gene in E.coli
Authors:Chen Jianrong  Guo Qingquan  Zhang Xuewen  Chen Jinjun
Abstract:Ramie caffeoyl-CoA 3-O-methyltransferase was expressed by pQE High-level Expression system in E.coli.The molecular weight of Ramie Fusion caffeoyl-CoA3-O-methyltransferase is 29.4 kD.The structure of the enzyme has been constructed by SwissModel server.Multiplex structure of the enzyme,Sinapoyl CoA,SAH and Ca2 has been constructed by Docking module in software InsightII,and has been optimized by Discover module.It can be presume that Ramie caffeoyl-CoA 3-O-methyltransferase has catalyse function of O-methyltransferase,must been related to lignin monomer precursor methyltransfer.
Keywords:ramie(Boehmeria nivea)  lignin  caffeoyl-CoA 3-O-methyltransferase  prokaryotic expression
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