| 猪圆环病毒Ⅱ型ORF2截短基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 林彦星,孙彦伟,刘镇明,戚一达,耿忠海.猪圆环病毒Ⅱ型ORF2截短基因的克隆及原核表达[J].中国兽医学报,2007,27(4):464-468. |
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| 作者姓名： | 林彦星 孙彦伟 刘镇明 戚一达 耿忠海 |
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| 作者单位： | 1. 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642
2. 广东省动物防疫监督总所,广东,广州,510230 |
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| 摘 要： | 参照GenBank中猪圆环病毒Ⅱ型（Porcinecircovirus type 2，PCV2）的ORF2基因序列，设计合成1对引物，对PCV-2ZS株ORF2基因上含主要抗原位点的片段（ORF2-ME）进行PCR扩增，并克隆到pMD18-T Simple Vector中，进行序列测定。将重组质粒pMD—ORF2-ME的EcoR Ⅴ和Xhol Ⅰ双酶切产物插入原核表达载体pET-32a（＋），构建原核表达载体pET—ORF—ME。测序分析表明，克隆的ORF2-ME与GenBank上公布的PCV2毒株核苷酸序列同源性为99％～100％，推导的氨基酸序列同源性介于91％～100％之间。原核表达载体导入BL21（DE3）后用IPTG进行诱导表达，收集菌液进行SDS—PAGE和Western Blotting分析，结果表明ORF2-ME在BL21（DE3）中成功表达，所表达融合蛋白的相对分子质量约为40000，并能被PCV2阳性血清所识别，这就为PCV2感染诊断和抗体检测提供了依据。
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| 关 键 词： | ORF2截短基因 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1005-4545（2007）04-0464-05 |
| 修稿时间： | 2005-10-15 |
Cloning and prokaryotic expression of the ORF2 truncated gene of porcine circovirus type 2 |
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| LIN Yan-xing,SUN Yan-wei,LIU Zhen-ming,QI Yi-da,GENG Zhong-hai.Cloning and prokaryotic expression of the ORF2 truncated gene of porcine circovirus type 2[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(4):464-468. |
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| Authors: | LIN Yan-xing SUN Yan-wei LIU Zhen-ming QI Yi-da GENG Zhong-hai |
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| Keywords: | PCV2 |
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