| 草鱼肠道粘膜细胞的分离与原代培养 |
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| 引用本文： | 姚仕彬,叶元土,蔡春芳,姚林杰,许凡,刘猛,萧培珍,王丽宏.草鱼肠道粘膜细胞的分离与原代培养[J].上海海洋大学学报,2013,22(1):33-41. |
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| 作者姓名： | 姚仕彬 叶元土 蔡春芳 姚林杰 许凡 刘猛 萧培珍 王丽宏 |
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| 作者单位： | 苏州大学 医学部;苏州大学 医学部;苏州大学 医学部;苏州大学 医学部;苏州大学 医学部;苏州大学 医学部;苏州大学 医学部;苏州大学 医学部 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31172417）；苏州市应用基础（农业）项目（N313401210） |
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| 摘 要： | 以强化培育后草鱼的肠道粘膜为试验材料,采用不同消化法和离心转速梯度分离肠道粘膜细胞团,分别试验不同培养液与不同CO2浓度组合、胎牛血清浓度及细胞接种浓度时细胞生长效果,并且观察草鱼原代肠道粘膜细胞生长过程,同时采用3种细胞形态观察法、MTT检测法及相关酶活力系统评价细胞培养效果。结果表明:采用机械刮取消化法,分离转速为400 r/min,在使用M199培养液、6%CO2、15%胎牛血清、接种浓度为2×103(个/孔)条件下可批量复制草鱼原代肠道粘膜上皮细胞;细胞增殖过程符合动物原代肠道粘膜上皮细胞生长分化规律,采用荧光倒置显微镜与Giemsa染色法相结合、MTT检测法、AKP酶活力及LDH/MTT OD值可系统评价细胞培养效果。
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| 关 键 词： | 草鱼 肠道粘膜细胞 分离方法 原代培养 |
| 收稿时间： | 2012/2/13 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2012/5/28 0:00:00 |
Dissociation and primary culture of Ctenopharyngodon idellus intestinal epithelial cells |
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| YAO Shi-bin,YE Yuan-tu,CAI Chun-fang,YAO Lin-jie,XU Fan,LIU Meng,XIAO Pei-zhen and WANG Li-hong.Dissociation and primary culture of Ctenopharyngodon idellus intestinal epithelial cells[J].Journal of Shanghai Ocean University,2013,22(1):33-41. |
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| Authors: | YAO Shi-bin YE Yuan-tu CAI Chun-fang YAO Lin-jie XU Fan LIU Meng XIAO Pei-zhen and WANG Li-hong |
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| Institution: | 1.Key Laboratory of Aquatic Nutrition of Jiangsu Province,Suzhou University,Suzhou 215123,Jiangsu,China;2.Beijing Nutrition Resources Institute,Open Laboratory for Aquatic Animal Nutrition,Beijing 100069,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ctenopharyngodon idellus intestinal epithelial cells dissociation method primary culture |
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