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山麻鸭睾丸和肝脏中N-乙酰够-D-氨基葡萄糖苷酶的分离提取及其性质的比较
引用本文:王长康,艾启青,黄小红,刘建昌.山麻鸭睾丸和肝脏中N-乙酰够-D-氨基葡萄糖苷酶的分离提取及其性质的比较[J].福建农林大学学报(自然科学版),2009,38(1).
作者姓名:王长康  艾启青  黄小红  刘建昌
作者单位:福建农林大学动物科学学院,福建福州350002
摘    要:山麻鸭的睾丸和肝脏经硫酸铵分级沉淀分离、DEAE-32离子交换柱层析,获得的肝脏N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC3.2.1.52)比活力为85.30U·mg-1,纯化倍数为10.48.睾丸NAGase再进一步通过Sephacryl S-300凝胶过滤纯化,获得的NAGase比活力为5537.00U·mg-1,纯化倍数为59.20.睾丸NAGase经聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,出现单一蛋白带,测定等电点p,为5.05.以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP—NAG)为底物研究酶催化底物水解的反应动力学.结果表明:山麻鸭睾丸和肝脏NAGase的最适pH分别为5.70和5.60,酶在pH为3.00—8.43时较稳定,而pH〉8.43时很快失活;酶的最适温度分别为45和60℃,当温度为80℃时酶完全失活.睾丸NAGase在40℃下处理30min,酶活力保持稳定;而肝脏NAGase在30℃下处理30min,酶活力保持稳定,酶催化pNP.NAG水解反应遵循米氏方程,睾丸和肝脏NAGase水解pNP-NAG的K分别为0.17和0.21mmol·L-1,k分别为8.82和7.25p.mol·L-1·min-1,活化能分别为57.57和79.47kJ·mol-1.

关 键 词:山麻鸭  N-乙酰1B-D&  #183  葡萄糖苷酶  性质
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