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| 南瓜SRAP扩增体系与扩增程序的优化 | |
| 引用本文： | 刘泽发,孙小武,罗伏青,张龑,寇明明,董亚静.南瓜SRAP扩增体系与扩增程序的优化[J].西北农业学报,2008,17(6):148-152,183. |
| 作者姓名： | 刘泽发 孙小武 罗伏青 张龑 寇明明 董亚静 |
| 作者单位： | 1. 湖南农业大学,园艺园林学院,湖南长沙,410128;湖南省瓜类研究所,湖南邵阳,422001 2. 湖南省瓜类研究所,湖南邵阳,422001 3. 湖南农业大学,园艺园林学院,湖南长沙,410128 |
| 摘 要： | 利用L45正交设计对影响南瓜SRAP反应体系的MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶含量、引物浓度及模板DNA浓度等5个因素进行了筛选,快速得到稳定性和重复性好的南瓜SRAP扩增体系。对复性温度、PCR循环次数等影响南瓜SRAP扩增结果的重要因素进行了优化。最终优化的南瓜SRAP反应体系为25μL反应液中:10×buffer2.5μL,0.2 mmol/L dNTPs,引物0.2μmol/L,1.5 mmol/LMgCl2,DNA模板6 ng/μL,Taq酶1.5 U。本研究最终确立的PCR反应程序为:94℃预变性5 min,94℃变性40 s,35℃退火40 s,72℃延伸90 s,进行5个循环,94℃变性40 s,50℃退火40 s,72℃延伸90 s,进行32个循环,最后72℃延伸5 min。在此条件下得到的SRAP标记可为南瓜遗传多样性、分子标记及辅助育种等研究提供稳定有效的手段。 |
| 关 键 词： | 南瓜 反应体系 |
| 收稿时间： | 2008/3/3 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2008/4/18 0:00:00 |
Optimization of SRAP Reaction System in Squash |
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| LIU Ze-f,SUN Xiao-wu,LUO Fu-qing,ZHANG Yan,KOU Ming-ming and DONG Ya-jing.Optimization of SRAP Reaction System in Squash[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2008,17(6):148-152,183. | |
| Authors: | LIU Ze-f SUN Xiao-wu LUO Fu-qing ZHANG Yan KOU Ming-ming and DONG Ya-jing |
| Institution: | Landiscape and Horticultural Institute of Hunan University of Agriculture, Changsha Hunan 410128, China;Melon Institute of Hunan, Shaoyang Hunan 422001, China;Landiscape and Horticultural Institute of Hunan University of Agriculture, Changsha Hunan 410128, China;Melon Institute of Hunan, Shaoyang Hunan 422001, China;Melon Institute of Hunan, Shaoyang Hunan 422001, China;Landiscape and Horticultural Institute of Hunan University of Agriculture, Changsha Hunan 410128, China;Landiscape and Horticultural Institute of Hunan University of Agriculture, Changsha Hunan 410128, China;Melon Institute of Hunan, Shaoyang Hunan 422001, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | SRAP |
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