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康氏木霉HEX1蛋白的原核表达及纯化
引用本文:唐 俊,陆 娟,许惠芬,等.康氏木霉HEX1蛋白的原核表达及纯化[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2014,42(10):147-151.
作者姓名:唐 俊  陆 娟  许惠芬  
作者单位:阜阳师范学院 生命科学学院;上海交通大学 农业与生物学院;上海交通大学 农业与生物学院;山东省淄博市桓台县林业局
基金项目:国家自然科学基金项目(41001189);安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2013A203);阜阳师范学院科技成果孵化基金项目(2013KJFH04);阜阳师范学院教研项目(2013JYXM30)
摘    要:【目的】对康氏木霉HEX1蛋白进行原核表达和纯化,为进行抗体制备及深入研究HEX1功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增康氏木霉hex1基因,构建pMD19-T-hex1重组克隆质粒,在此基础上构建pET28a-hex1表达载体,转化E.coli BL21(DE3)细胞。通过IPTG诱导表达,对重组HEX1蛋白进行可溶性分析、纯化及鉴定。【结果】成功克隆了长660bp的hex1基因并构建了融合表达载体,HEX1蛋白在IPTG诱导下得到表达。融合蛋白主要以包涵体形式存在,能与抗His标签的兔多克隆抗体发生特异性反应,并纯化出了融合表达蛋白。【结论】康氏木霉HEX1蛋白在原核细胞中得到成功表达及纯化,获得了分子质量约为25ku的重组蛋白。

关 键 词:康氏木霉  HEX1  原核表达  蛋白纯化
收稿时间:2014/1/24 0:00:00

Prokaryotic expression and purification of HEX1 of Trichoderma knoningii
TANG Jun,LU Juan and XU Hui-fen,et al.Prokaryotic expression and purification of HEX1 of Trichoderma knoningii[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2014,42(10):147-151.
Authors:TANG Jun  LU Juan and XU Hui-fen  
Abstract:
Keywords:Trichoderma knoningii  HEX1  prokaryotic expression  protein purification
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