空肠弯曲菌荧光偏振抗体检测方法的建立 |
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引用本文: | 王莉,沙洲,李诗语,卢晓冉,卜昭阳,梁佳茗,王兴龙.空肠弯曲菌荧光偏振抗体检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2018(3). |
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作者姓名: | 王莉 沙洲 李诗语 卢晓冉 卜昭阳 梁佳茗 王兴龙 |
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作者单位: | 吉林农业大学动物科技学院;军事医学科学院军事兽医研究所;吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室 |
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摘 要: | 为建立血清中空肠弯曲菌抗体的荧光偏振检测(FPIA)方法,本研究对空肠弯曲菌的黏附蛋白PEB1A进行原核表达。Western blot鉴定显示该重组蛋白具有良好的抗原性;FITC标记空肠弯曲菌黏附蛋白PEB1A形成示踪物,通过确定示踪物的最佳反应浓度、反应时间及血清最佳稀释度,建立空肠弯曲菌的FPIA抗体检测方法。结果显示:本实验建立的空肠弯曲菌FPIA抗体检测方法的检测标准为FP值≥150m P为阳性,FP值150为阴性。该方法仅与空肠弯曲菌阳性血清发生特异性反应,与产肠毒素型大肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、金黄色葡萄球菌的抗血清均无交叉反应,具有较强的特异性。该方法对抗体的最低检测效价为1∶80,批内和批间的重复性试验变异系数均小于10%,具有较好的重复性。表明本研究建立的FPIA方法为血清中空肠弯曲菌抗体的快速检测提供了一种可行的方法。
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