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绵羊肺炎支原体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:林裕胜,江锦秀,张靖鹏,游伟,胡奇林.绵羊肺炎支原体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2018(4).
作者姓名:林裕胜  江锦秀  张靖鹏  游伟  胡奇林
作者单位:福建省农业科学院畜牧兽医研究所
摘    要:为建立一种快速检测绵羊肺炎支原体(Mo)的检测方法,本研究根据GenBank登录的Mo Y-98株(KR021380.1)黏附素基因p113基因序列设计1对特异性引物和探针,建立了针对Mo的TaqMan荧光定量检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测Mo,对丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、莱氏无胆甾原体及羊传染性脓疱病毒(ORFV)等羊常见病原扩增结果均为阴性;该方法最低检测限为10拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于2%;采用该方法对96份临床样品进行检测,结果 Mo的阳性率为67.7%(65/96),比常规PCR法及支原体分离鉴定法更加敏感。以上结果表明本研究建立的Mo TaqMan荧光定量PCR方法可以用于Mo的准确快速检测及羊支原体性肺炎的诊断和流行病学调查。

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