| 猪流行性腹泻病毒和猪博卡病毒3/4/5型双重PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 韩昊莹,张鸿鑫,徐朋丽,乔涵,张宇,杨兴武,陈红英.猪流行性腹泻病毒和猪博卡病毒3/4/5型双重PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2018(3). |
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| 作者姓名： | 韩昊莹 张鸿鑫 徐朋丽 乔涵 张宇 杨兴武 陈红英 |
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| 作者单位： | 河南农业大学牧医工程学院;郑州市猪重大疫病防控重点实验室 |
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| 摘 要： | 为建立快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪博卡病毒(PBoV)3/4/5型的双重PCR方法,本研究根据Gen Bank中登录的PEDV ORF1基因序列和PBoV不同基因型VP1序列,设计2对特异性引物,通过对PCR扩增条件的优化,建立了能够同时检测PEDV和PBoV3/4/5型双重PCR方法,特异性检测结果显示该方法对猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、大肠杆菌、沙门氏菌、猪链球菌核酸扩增均为阴性;敏感性检测结果显示,对PEDV和PBoV3/4/5型重组质粒标准品的最低检出量分别为837拷贝/μL和1 000拷贝/μL;临床样品的检测结果显示,所建立的双重PCR方法可同时有效地检测出PEDV和PBoV3/4/5型混合感染及单独感染。本研究建立的双重PCR方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,为快速、高效检测PEDV和PBoV提供了技术帮助。
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