| 鸭肠炎病毒UL24/C基因酵母双杂交诱饵载体构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 高兴红,贾仁勇.鸭肠炎病毒UL24/C基因酵母双杂交诱饵载体构建及鉴定[J].中国预防兽医学报,2018(6). |
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| 作者姓名： | 高兴红 贾仁勇 |
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| 作者单位： | 遵义医学院贵州省普通高等学校传染病与生物安全特色重点实验室;四川农业大学禽病防治研究中心;四川农业大学预防兽医研究所;动物疫病与人类健康四川省重点实验室 |
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| 摘 要： | 为构建DEV UL24/C蛋白的酵母双杂交的诱饵载体,本研究以DEV CHv株基因组DNA为模板,经一步法克隆构建pGBKT7-UL24/C诱饵质粒,质粒转化酵母菌株后进行自激活活性检测、免疫印迹检测和毒性检测。结果显示,诱饵质粒pGBKT7-UL24/C插入片段大小为510 bp,且未发生基因突变;pGBKT7-UL24/C质粒转化Y2HGold菌株后的自激活检测显示诱饵菌株无自激活活性,免疫印迹检测表明该诱饵菌株成功表达DEV UL24/C蛋白,毒性检测表明该诱饵蛋白对宿主菌Y2HGold无毒性作用。综上表明,未研究正确构建了UL24/C基因酵母双杂交诱饵载体Y2HGold(pGBKT7-UL24/C),为筛选与DEV UL24蛋白相互作用蛋白、探究DEV UL24蛋白功能及分子机制奠定了基础。
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