| TK基因重组缺陷山羊痘病毒构建及其生物学特性鉴定 |
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| 引用本文： | 郑敏,梁晟,郑彦梓,兰彬,韦显凯,苏娇秀,郑列丰,李常挺.TK基因重组缺陷山羊痘病毒构建及其生物学特性鉴定[J].广西农业科学,2013(9):1552-1557. |
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| 作者姓名： | 郑敏 梁晟 郑彦梓 兰彬 韦显凯 苏娇秀 郑列丰 李常挺 |
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| 作者单位： | [1]广西动物疫病预防控制中心,南宁530001 [2]钦州市动物疫病预防控制中心,广西钦州535000 [3]隆安县动物疫病预防控制中心,广西隆安532700 |
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| 基金项目： | 广西青年科学基金项目（2013GXNSFBB053006,桂科青0991042） |
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| 摘 要： | 目的]利用同源重组技术构建TK基因缺陷的山羊痘病毒（GTPV）毒株,为研制出更安全、高效的GTPV弱毒疫苗和病毒载体提供备选毒株.方法]采用PCR克隆GTPV AV41株TK基因（ORF56）及其侧翼基因组片段,在TK基因内部插入报告基因EGFP抗性基因gpt达盒,构建GTPV重组转移载体pTK-Eg.将重组转移载体pTK-Eg与GTPV AV41株共转染Vero细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,鉴定其生长特性和遗传稳定性,并接种山羊评价其安全性和免疫原性.结果]成功构建获得一株TK基因缺陷的重组病毒vTK-Eg.与亲本毒株GTPV AV41相比,vTK-Eg的生长特性及其形成的细胞病变均未发生显著改变,只是毒价略微下降100.5个数量级;在原代牛睾丸（BT）细胞上连续传代,至少在10代内保持遗传性状和病毒滴度稳定.接种vTK-Eg的山羊精神和食欲均正常,接种后体温升高和局部反应的严重程度均较接种亲本毒株GTPV AV41的山羊有所降低;vTK-Eg与GTPV AV41株诱导山羊产生的GTPV中和抗体水平无明显差异（P＞0.05）.结论]构建的TK基因重组缺陷病毒vTK-Eg具有良好的遗传稳定性和免疫原性,较亲本毒株其安全性也有所提高,可作为研制GTPV基因工程弱毒疫苗和活载体疫苗的备选毒株.
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| 关 键 词： | 山羊痘病毒 似基因 重组病毒 基因缺陷 生物学特眭 |
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