| 砀山酥梨果实COMT基因的克隆和表达分析 |
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| 引用本文： | 程敏,尹梅,邹鹤伟,金青,闫冲冲,林毅,张金云,徐义流,蔡永萍.砀山酥梨果实COMT基因的克隆和表达分析[J].核农学报,2015,29(3):454-461. |
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| 作者姓名： | 程敏 尹梅 邹鹤伟 金青 闫冲冲 林毅 张金云 徐义流 蔡永萍 |
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| 作者单位： | 1. 安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036
2. 安徽农业科学院园艺研究所,安徽合肥,230031 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31171944,30771483) |
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| 摘 要： | 梨果实石细胞的发育和木质素的合成、转运及沉积密切相关。咖啡酸氧甲基转移酶(COMT)是木质素合成途径中的1种关键酶,主要参与紫丁香基木质素(syringyl lignin,S-木质素)的生物合成。本研究以砀山酥梨果实为材料,利用RT-PCR技术并结合RACE方法,得到砀山酥梨COMT基因的全长c DNA,命名为Pb COMT(Gen Bank登录号为KC905086)。该基因全长1 371 bp,开放阅读框为1 098 bp,编码365个氨基酸。进化树分析发现砀山酥梨COMT蛋白具有很高同源性,与苹果的相似性达到94%。将该基因重组到表达载体p ET-32a(+)中进行原核表达,电泳检测到1条大约60.0 k D的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量相符。荧光定量表达分析得知,梨果实Pb COMT基因表达量变化与木质素的含量变化趋势基本一致,并且和石细胞发育规律有很大的相关性。本研究为阐明梨石细胞发育分子机理奠定基础,为分子调控石细胞含量、改善梨果实口感提供了科学依据。
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| 关 键 词： | 砀山酥梨 PbCOMT 生物信息学分析 原核表达 荧光定量表达 |
Cloning and Expression Analysis of COMT Gene in Pyrus bretschneideri cv.Dangshan Su Fruit |
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| CHENG Min;YIN Mei;ZOU Hewei;JIN Qing;YAN Chongchong;LIN Yi;ZHANG Jinyun;XU Yiliu;CAI Yongping.Cloning and Expression Analysis of COMT Gene in Pyrus bretschneideri cv.Dangshan Su Fruit[J].Acta Agriculturae Nucleatae Sinica,2015,29(3):454-461. |
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| Authors: | CHENG Min;YIN Mei;ZOU Hewei;JIN Qing;YAN Chongchong;LIN Yi;ZHANG Jinyun;XU Yiliu;CAI Yongping |
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| Institution: | CHENG Min;YIN Mei;ZOU Hewei;JIN Qing;YAN Chongchong;LIN Yi;ZHANG Jinyun;XU Yiliu;CAI Yongping;School of Life Science,Anhui Agricultural University;Horticultural Institute,Anhui Academy of Agricultural Sciences; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pyrus bretschneideri cv Dangshan Su PbCOMT bioinformatics analysis prokaryotic expression real-time quantitative expression |
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