|
|||||
|
|
| 内含NDV核酸的耐核糖核酸酶病毒样颗粒作为荧光定量RT-PCR内标的制备与鉴定 | |
| 作者单位： | ;1.宣城市畜牧兽医局;2.宣州区畜牧兽医管理局;3.安徽华卫集团禽业有限公司 |
| 摘 要： | 为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。 |
| 关 键 词： | 新城疫 耐核糖核酸酶 病毒样颗粒 MS2噬菌体 荧光RT-PCR |
Preparation and identification of ribonuclease-resistant virus-like particles as an internal standard for Newcastle Real-time fluorescent RT-PCR |
|
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |