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| 猪流行性腹泻病毒Nsp7蛋白的表达与多克隆抗体制备 | |
| 作者单位： | ;1.河南农业大学牧医工程学院 |
| 摘 要： | 为了解猪流行性腹泻病毒(PEDV)非结构蛋白7(Nsp7)的结构特征和免疫原性,本研究通过生物信息学分析Nsp7蛋白序列特征及空间结构,在此基础上对Nsp7进行原核表达和纯化,并制备抗Nsp7多克隆抗体。结果显示,Nsp7基因在PEDV不同毒株间高度保守,Nsp7蛋白的三级结构主要由4个α螺旋片组成。SDS-PAGE试验表明,Nsp7在大肠杆菌中获得大量表达,重组蛋白大小为9.2 ku,经纯化后得到单一条带。采用纯化的Nsp7免疫兔制备多克隆抗体,然后经Western blot和间接免疫荧光试验鉴定,多克隆抗体能够特异性识别重组Nsp7蛋白和PEDV感染细胞的Nsp7蛋白,证明Nsp7免疫原性良好,为后续研究Nsp7的功能及研制以Nsp7为检测靶标的PEDV诊断试剂盒奠定基础。 |
| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 非结构蛋白7 生物信息学分析 原核表达 多克隆抗体 |
Prokaryotic expression of Nsp7 of porcine epidemic diarrhea virus and preparation of polyclonal antibodies against Nsp7 |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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