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猪主要腹泻病毒多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用
引用本文:闫晓光,丁庆文,任豪杰,张宇航,李泽辉,胡慧.猪主要腹泻病毒多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J].中国兽医学报,2023(4):654-659+667.
作者姓名:闫晓光  丁庆文  任豪杰  张宇航  李泽辉  胡慧
作者单位:1. 河南农业大学动物医学院;2. 河南省动物性食品安全重点实验室
摘    要:为建立检测猪主要腹泻病毒的多重RT-PCR方法,本试验参考GenBank中登录的猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus of swine, TGEV)M基因、猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus, PSV)VP1基因、猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)N基因和猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)N基因的序列,分别设计相应的引物,构建4种病毒的阳性质粒。以阳性质粒为标准品,通过优化反应条件和反应程序,建立了检测猪主要腹泻病毒的多重RT-PCR方法,并确定了该检测方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示,该方法具有较高的灵敏性,对PSV、TGEV、PDCoV和PEDV的最低检测量分别为1.37×102,1.44×102,1.51×102和1.56×102拷贝/μL。而扩增猪细小病毒(porcine parvovirus, PPV)、猪瘟病...

关 键 词:猪主要腹泻病毒  多重RT-PCR  猪传染性胃肠炎病毒  猪萨佩罗病毒  猪与冠状病毒  猪流行性腹泻病毒
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