| 猪CCL2的原核表达及其多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 东梦珂,郑南南,吴宏举,侯浩宇,陈寅龙,李潮,张改平,杜永坤.猪CCL2的原核表达及其多克隆抗体的制备[J].中国兽医学报,2023(1):29-34. |
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| 作者姓名： | 东梦珂 郑南南 吴宏举 侯浩宇 陈寅龙 李潮 张改平 杜永坤 |
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| 作者单位： | 河南农业大学动物医学学院国家动物免疫学国际联合研究中心 |
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| 基金项目： | 中国博士后科学基金资助项目(2021M690926)；;国家自然科学基金专项资助项目(31941001)；;河南省高等学校重点科研资助项目(21A230010)； |
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| 摘 要： | CCL2作为一种典型的促炎因子，在病毒感染、各类肿瘤、自身免疫疾病等许多病症的发生、发展中都有着举足轻重的意义，然而猪的CCL2研究鲜有报道。本研究使用PCR方式扩增CCL2基因，将其克隆于大肠杆菌原核表达系统的pET-28a(+)表达载体中，成功构建重组表达质粒pET-28a(+)-CCL2,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中，再经0.1mmol/L的IPTG诱导表达，SDS-PAGE结果表明猪CCL2蛋白在大肠杆菌中获得可溶性表达。将CCL2蛋白纯化后免疫新西兰大白兔，4次免疫后收集血清，通过ELISA方法检测其效价达到1∶128 000。Western blot和IFA测定结果显示本研究获得的猪CCL2多克隆抗体具有较好的特异性。本研究获得的猪CCL2蛋白和针对CCL2的兔多克隆抗体为未来研究猪CCL2的在疾病中的相关作用及生物学功能提供了试验材料。
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| 关 键 词： | 猪CCL2 原核表达 多克隆抗体 |
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