| 猪流行性腹泻病毒和猪圆环病毒4型双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立 |
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| 引用本文： | 李洪炫,滑宇鹏,彭琳颖,高家俊,陈琳琳,李法昊,金钺,陈红英.猪流行性腹泻病毒和猪圆环病毒4型双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立[J].中国兽医学报,2023(1):23-28. |
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| 作者姓名： | 李洪炫 滑宇鹏 彭琳颖 高家俊 陈琳琳 李法昊 金钺 陈红英 |
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| 作者单位： | 河南农业大学动物医学院 |
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| 基金项目： | 河南省高校科技创新人才支持计划资助项目(21HASTIT039)； |
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| 摘 要： | 分别靶向猪流行性腹泻病毒(PEDV) M基因和猪圆环病毒4型(PCV4)ORF2基因，合成了2对特异性引物，建立了同时检测PEDV和PCV4的双重SYBR GreenⅠ荧光PCR检测方法。结果显示，PEDV和PCV4在一个反应体系中出现明显不同的熔解峰(Tm),PEDV的Tm值为84℃,PCV4的Tm值为79℃,而对其他常见的非靶标猪病毒没有显示特定的熔解峰，且对于PEDV和PCV4的最低检测极限分别为55.2,44.1拷贝/μL。利用本研究建立的双重荧光PCR方法对30份猪临床样品进行检测，结果显示，PEDV和PCV4的检出率分别为40%(12/30)和60%(18/30),PEDV和PCV4混合感染的检出率为33%(10/30),相较于常规PCR方法更加灵敏。该方法能够同时对PEDV和PCV4进行检测，极大地提高了检测效率和准确度，为PEDV和PCV4的诊断与防控提供技术支持。
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| 关 键 词： | PEDV PCV4 荧光定量PCR |
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