| 小反刍兽疫病毒RT-RAA-CRISPR/Cas12a可视化快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 黄超华,阮周曦,路平,吴江,曹琛福,林彦星,花群义.小反刍兽疫病毒RT-RAA-CRISPR/Cas12a可视化快速检测方法的建立[J].中国兽医学报,2023(10):2030-2034. |
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| 作者姓名： | 黄超华 阮周曦 路平 吴江 曹琛福 林彦星 花群义 |
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| 作者单位： | 1. 深圳海关动植物检验检疫技术中心;2. 中国动物卫生与流行病学中心 |
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| 摘 要： | 为建立小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus, PPRV)可视化快速检测方法，本研究根据PPRV N基因的保守序列设计、合成和筛选出反转录重组聚合酶介导恒温扩增(RT-RAA)特异性引物和CRISPR/Cas12a特异性crRNA。结合侧向流试纸，本研究建立了一种PPRV RT-RAA-CRISPR/Cas12a可视化快速检测方法，并对该方法的性能进行了评估。结果显示，该方法特异性良好，与蓝舌病毒(BTV)、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、口蹄疫病毒(FMDV)、羊痘病毒(CaPV)、猪水泡病病毒(SVDV)、伪狂犬病毒(PRV)等病毒核酸无交叉反应；敏感性高，最低可检出4.30×101拷贝/μL的PPRV核酸；应用该方法及国家标准推荐的RT-qPCR方法对60个模拟样品进行平行检测，结果显示Kappa值为0.918,表明两者具有高度一致性。综上表明，本研究建立的PPRV RT-RAA-CRISPR/Cas12a可视化快速检测方法特异性好、敏感性高，且操作简单、无需特殊仪器，可应用于野外或基层农场的PPRV快速筛查检测工作...
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫病毒 RT-RAA CRISPR/Cas12a |
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