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鸡传染性支气管炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用
引用本文:赵佳,郭梦娇,张成成,薄宗义,楚电峰,曹永忠,吴艳涛,张小荣.鸡传染性支气管炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用[J].中国兽医学报,2023(4):693-698.
作者姓名:赵佳  郭梦娇  张成成  薄宗义  楚电峰  曹永忠  吴艳涛  张小荣
作者单位:1. 扬州大学兽医学院江苏省动物重要疫病预防控制协同创新中心;2. 动物基因工程疫苗国家重点实验室;3. 扬州大学农业科技发展研究院教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室
基金项目:国家重点研发计划资助项目“科技助力经济2020”专项(SQ2020YFF0426460);;财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助项目(CARS-40);
摘    要:建立了一种检测鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)抗体终点滴度(end-point titer, ET)的间接ELISA方法,以应用于监测鸡免疫疫苗或者感染野毒后的抗体。以大肠杆菌表达的IBV核衣壳(N)蛋白作为包被抗原,以SPF鸡血清和感染IBV的SPF鸡血清分别作为阴性血清和阳性血清对照,优化确定出ELISA的各项技术参数。对66份SPF鸡血清进行测试,确定了阴、阳性S/P临界值为0.385。特异性试验表明包被抗原与其他常见病原的阳性血清均不发生交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于10.00%。选取了50份临床血清样品,通过阳性-阴性阈值(positive negative threshold, PNT)基线确定ET值,建立了固定血清稀释倍数(1∶500)处S/P值与ET的线性回归方程,相关系数(R2)为0.959 3(P<0.000 1)。通过检测2个商品鸡群在1~49日龄不同时间点采集的461份血清样本,比较了建立的IBVN-ELISA方法与IDEXX公司提供的商品化试剂盒。本研究建立的I...

关 键 词:鸡传染性支气管炎病毒  核衣壳(N)蛋白  抗体检测  间接ELISA
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