猪细小病毒VP2蛋白的原核表达及其免疫原性评估 |
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引用本文: | 王利霞,朱利塞,钟永亮,田欣,林福新,王贵平,白挨泉,贾爱卿.猪细小病毒VP2蛋白的原核表达及其免疫原性评估[J].中国兽医学报,2023(10):1999-2004+2019. |
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作者姓名: | 王利霞 朱利塞 钟永亮 田欣 林福新 王贵平 白挨泉 贾爱卿 |
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作者单位: | 1. 佛山科学技术学院;2. 广东海大畜牧兽医研究院有限公司;3. 广东省养猪与猪病防控技术研究企业重点实验室 |
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基金项目: | 广东省科技计划资助项目(2020B1212070023); |
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摘 要: | 利用原核表达载体pET28a和pColdⅠ与猪细小病毒VP2基因分别构建重组表达质粒,并采用与伴侣蛋白共表达和低温诱导表达猪细小病毒VP2蛋白,并以电镜观察、血凝效价测定等进行鉴定。结果显示,2个表达载体均能对重组蛋白进行可溶性表达。冷休克载体组pColdⅠ-VP2蛋白在上清中表达效率更高且杂蛋白较少,诱导时不需要额外添加L-阿拉伯糖,表达过程工艺相对更简单。纯化后的pColdⅠ-VP2蛋白具有一定的免疫反应性,能在体外组装成病毒样颗粒(virus-like particles, VLPs),且具有血凝活性,使用206佐剂混合乳化重组蛋白免疫豚鼠后,血清中能检测到高滴度血凝抑制抗体。上述结果为进一步研究新型安全高效的猪细小病毒疫苗提供了数据支持。
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关 键 词: | 猪细小病毒 VP2蛋白 原核表达 病毒样颗粒 |
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