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| 安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白的原核表达及其免疫原性研究 | |
| 引用本文： | 彭昊,唐林生,李军,黄维义,陶立,陈泽祥,谢永平,许力干,杨威.安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白的原核表达及其免疫原性研究[J].广西农业科学,2014,45(10). |
| 作者姓名： | 彭昊 唐林生 李军 黄维义 陶立 陈泽祥 谢永平 许力干 杨威 |
| 作者单位： | 1. 广西兽医研究所/广西畜禽疫苗新技术重点实验室,南宁530001;广西大学动物科学技术学院,南宁530005 2. 广西大学动物科学技术学院,南宁,530005 3. 广西兽医研究所/广西畜禽疫苗新技术重点实验室,南宁,530001 |
| 基金项目： | 公益性行业(农业)专项项目，广西基本科研业务费专项项目，广西水产畜牧兽医局科技项目 |
| 摘 要： | 目的]验证安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)的免疫原性,为建立安氏隐孢子虫病免疫学诊断方法奠定基础.方法]根据GenBank已公布的安氏隐孢子虫COWP同源基因序列(DQ060431)设计引物,克隆COWP基因并构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后,采用蛋白印迹法检测其免疫原性.结果]扩增获得的COWP基因片段为549bp,其序列与GenBank已公布CO WP同源基因序列(DQ060431)的同源性达100％,将其插入pET-32a载体可构建pET-32a-COWP表达载体.重组菌在30℃下经0.5 mmol/L IPTG诱导5h后,其表达形式以可溶性表达为主;NTA-Ni亲和层析柱层析时用200 mmol/L咪唑洗脱液洗脱,即能得到纯化的重组蛋白,重组蛋白分子量约40 kDa.以抗His标签鼠单克隆抗体或鼠抗安氏隐孢子虫高免血清为一抗进行Western blotting检测,均能获得预期的目的条带.结论]重组COWP蛋白具有良好的免疫原性,可作为安氏隐孢子虫病免疫学诊断的候选抗原. |
| 关 键 词： | 安氏隐孢子虫 卵囊壁蛋白 原核表达 免疫原性 |
Prokaryotic expression and immunogenicity analysis of Cryptosporidium andersoni oocyst wall protein |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Cryptosporidium andersoni COWP expression immunogenicity |
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