| 着丝粒特异性蛋白CENP-Ⅰ的原核表达、纯化及抗体制备 |
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| 引用本文： | 蔡燕,翁亚光,施琼,徐远久,刘子杰,王应雄.着丝粒特异性蛋白CENP-Ⅰ的原核表达、纯化及抗体制备[J].西南大学学报,2008,30(2). |
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| 作者姓名： | 蔡燕 翁亚光 施琼 徐远久 刘子杰 王应雄 |
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| 作者单位： | 蔡燕,翁亚光,施琼,徐远久,刘子杰,CAI Yan,WENG Ya-guang,SHI Qiong,XU Yuan-jiu,LIU Zi-jie(重庆医科大学,医学检验系,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆市重点实验室,重庆,400016);王应雄,WANG Ying-xiong(重庆医科大学,公共卫生学院,重庆,400016) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部高等学校博士学科点专项科研基金，重庆市重点项目 |
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| 摘 要： | 用RT-PCR的方法从Hela细胞总RNA中获得编码CENP-Ⅰ蛋白第1-293位氨基酸的CENP-Ⅰ cDNA序列, 采用基因体外重组法将其克隆到原核表达载体pET-32a(+)内; 将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中, 用IPTG诱导表达、 Ni2+-NTA亲和层析纯化获得高纯度的重组蛋白质; 用纯化的蛋白质免疫家兔制备抗血清, 琼脂糖免疫双扩法和Western blot鉴定得到高效价的特异性抗CENP-Ⅰ抗体.
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| 关 键 词： | 着丝粒特异性蛋白质 CENP-Ⅰ 染色体不稳定性 |
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