| 鸡α干扰素基因的原核表达及其活性测定 |
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| 引用本文： | 戴华,郑佳玉,陈俊华,潘志明,焦新安.鸡α干扰素基因的原核表达及其活性测定[J].中国预防兽医学报,2009,31(10). |
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| 作者姓名： | 戴华 郑佳玉 陈俊华 潘志明 焦新安 |
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| 作者单位： | 扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部高校科技创新工程重大项目培育资金项目，FANEDD |
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| 摘 要： | 应用RT-PCR技术,从被刺激诱导的鸡脾脏淋巴细胞中扩增鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因cDNA,经克隆和测序后,构建原核表达重组质粒pGEX-proChIFN-α(全长序列)和pET-ChIFN-α(不含信号肽序列),并分别转化相应的表达菌.重组菌经IPTG诱导,SDS-PAGE结果表明,ChIFN-α基因均获得表达,重组蛋白大小分别为45 ku、26ku左右,表达的蛋白以包涵体形式存在.表达产物经变性、提纯、复性,重组蛋白的含量约为1 mg/mL.复性后的ChIFN-α能够在鸡胚成纤维细胞上抑制H5N1禽流感病毒的复制;用水泡性口炎病毒检测结果表明,重组ChIFN-α具有较高的抗病毒作用,其生物学活性达到2×106 u/mg.
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| 关 键 词： | 鸡α-干扰素基因 原核表达 抗病毒活性 |
Prokaryotic expression and activity assay of recombinant chicken interferon-alpha |
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