| 绿色荧光蛋白与黄瓜花叶病毒运动蛋白融合基因的构建及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 李睿,袁明,韩成贵,李大伟,于嘉林.绿色荧光蛋白与黄瓜花叶病毒运动蛋白融合基因的构建及在大肠杆菌中的表达[J].农业生物技术学报,2001,9(1):19-22. |
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| 作者姓名： | 李睿 袁明 韩成贵 李大伟 于嘉林 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业大学农业部
2. 中国农业大学 |
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| 基金项目： | 本研究由国家重点基础研究规划项目（No.G19990117),国家杰出青年科学基金项目（No.39625003），国家自然科学基金项目（No.19892380）和农业生物技术国家实验室开放课题基金项目资助 |
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| 摘 要： | 采用重组－PCR方法，扩增获得绿色荧光蛋白（GFP）与黄瓜花叶病毒运动蛋白（CMV MP）融合基因，将其克隆到pKEN上，构建了该融合基因的原核表达载体pKENG-M。SDS－PAGE及免疫印迹分析显示，57kD的融合蛋白基因在大肠杆菌DH5α中正确表达，激光共聚焦显微镜分析表明，在488nm光激发下，菌体呈亮绿色，表明融合蛋白保持绿色荧光特性。实验结果为进一步研究CMV MP的功能及其与胞间连丝和其他细胞成分的作用关系奠定了基础。
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| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白 黄瓜黄叶病毒 运动蛋白 融合基因 原核表达 |
| 修稿时间： | 2000年5月23日 |
Construction of GFP and
CMV MP Fusion Gene and its Expression in E.coli |
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| Abstract: | A fusion gene of green fluorescent protein(GFP)and movement protein of cucumber mosaic virus(CMV MP)was obtained by using recombination-PCR.The procaryotic expression vector pKENG-M for GFP:CMV MP was constructed by cloning in pKEN.Results from SDS-PAGE and western blot analysis showed that the 57 kD protein encoded by the fusion gene was expressed correctly in E.coli DH5 .Green fluorescence in the bacteria was observed under a confocal microscope when excited with 488 nm laser line,indicating GFP activity was maintained. |
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