| 牛Klf4基因重组反转录病毒载体的构建及产毒细胞株的建立 |
| |
| 引用本文： | 辛晓玲,吕长荣,陈冬梅,窦忠英.牛Klf4基因重组反转录病毒载体的构建及产毒细胞株的建立[J].畜牧兽医学报,2010,41(12). |
| |
| 作者姓名： | 辛晓玲 吕长荣 陈冬梅 窦忠英 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，陕西省重大科技计划 |
| |
| 摘 要： | 为了克隆牛Klf4基因并构建重组反转录病毒载体,得到稳定的产毒细胞株,本研究设计了带有酶切位点的一对引物,以接触抑制生长状态的MDBK细胞为材料,用RT-PCR方法克隆出牛Klf4基因的开放阅读框序列,将之插入干细胞反转录病毒载体pMSCVneo构成真核表达载体pMSCV-Klf4;采用脂质体法将pMSCV-Klf4转染包装细胞PT67,通过G418筛选得到稳定的产毒细胞株,电镜观察培养液上清中的病毒颗粒,同时病毒感染NIH3T3细胞测定其病毒滴度。结果表明,本研究克隆的牛Klf4基因开放阅读框序列与已发表序列(NM-001105385)比对有99.9%的高同源性;构建的重组载体质粒可正常包装,电镜下可观察到典型的病毒颗粒,筛选出的产毒细胞株病毒滴度达7.16×107CFU·mL-1。本研究成功构建的真核表达载体pMSCV-Klf4和得到的产毒细胞株,为进一步开展有关牛iPS细胞的研究奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 牛 Klf4基因 iPS细胞 反转录病毒载体 |
Construction of Recombinant Retroviral Vector with Bovine Klf4 and Establishment of a Virus Producing Cell Strain |
| |
| XIN Xiao-ling,L Chang-rong,CHEN Dong-mei,DOU Zhong-ying.Construction of Recombinant Retroviral Vector with Bovine Klf4 and Establishment of a Virus Producing Cell Strain[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2010,41(12). |
| |
| Authors: | XIN Xiao-ling L Chang-rong CHEN Dong-mei DOU Zhong-ying |
| |
| Institution: | XIN Xiao-ling,L(U) Chang-rong,CHEN Dong-mei,DOU Zhong-ying |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
