| 副猪嗜血杆菌oppA基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 车勇良,陈如敬,江斌,王隆柏,魏宏,吴学敏,庄向生,周伦江.副猪嗜血杆菌oppA基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立[J].福建农林大学学报(自然科学版),2015,44(3). |
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| 作者姓名： | 车勇良 陈如敬 江斌 王隆柏 魏宏 吴学敏 庄向生 周伦江 |
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| 作者单位： | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建福州,350013 |
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| 基金项目： | 国家公益性行业(农业)科研专项，福建省公益类科研专项，福建省农业科学院创新团队项目 |
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| 摘 要： | 采用PCR方法扩增副猪嗜血杆菌(Hps)的寡肽结合蛋白(Opp A)基因,序列测定结果表明,扩增片段全长1654 bp.将扩增片段插入表达载体p GEX-6P-1中,转化BL21进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明,重组融合蛋白大小约为87 ku,以纯化的重组蛋白Opp A作为抗原,建立Hps抗体的间接ELISA检测方法.通过试验确定最佳的反应条件为:抗原包被浓度为1.0μg·孔-1,于37℃包被1 h,待检血清的稀释度为1∶50,阳性判断标准(D450 nm)大于0.643.特异性和重复性试验结果表明,建立的间接ELISA方法具有良好的特异性和稳定性,可用于Hps抗体的检测.
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| 关 键 词： | 副猪嗜血杆菌 寡肽结合蛋白基因 克隆 表达 间接ELISA |
Cloning and expression of oppA gene and development of an indirect enzyme-linked immunosorbent assay for detecting antibody against Haemophilus parasuis |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Haemophilus parasuis oppA gene cloning expression indirect ELISA |
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