牛支原体膜蛋白6种提取方法的比较研究 |
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引用本文: | 陈忠琼,范媛,周蓓,蒋勇,张利,黎晓敏.牛支原体膜蛋白6种提取方法的比较研究[J].中国兽医学报,2013,33(6). |
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作者姓名: | 陈忠琼 范媛 周蓓 蒋勇 张利 黎晓敏 |
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作者单位: | 1. 西南大学动物科技学院,重庆400715;重庆市动物疫病预防控制中心,重庆401120 2. 西南大学动物科技学院,重庆400715;重庆市万州动物卫生监督所,重庆404000 3. 西南大学动物科技学院,重庆,400715 |
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基金项目: | 重庆市科委重大攻关资助项目 |
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摘 要: | 为筛选最佳牛支原体(mycoplasma bovis,Mb)膜蛋白的提取工艺,本试验以牛支原体W70株为代表,分别比较了4种浓度的TritonX-100 、TritonX-114、TritonX-100和TritonX-114;3种浓度碘化钾(KI)复合提取;反复冻融和超声裂解等6种Mb膜蛋白提取工艺和参数.各方法所获膜蛋白经SDS-PAGE和Bradford定量分析表明:不同方法的提取物中蛋白多肽和蛋白浓度各异;其中以3% TritonX-114和0.4%TritonX-100结合0.6 MKI两法提取的蛋白条带清晰度较好,蛋白浓度及蛋白收集率较高,蛋白多肽条数24~28条,蛋白相对分子质量分别在170 000~12 200和167 000~11 400之间;超声裂解及反复冻融法提取效果一般;而1.8 MKI法效果最差.研究发现3%TritonX-114或0.4 %TritonX-100结合0.6 MKI是Mb膜蛋白较优的提取方法.
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关 键 词: | 牛支原体 膜蛋白 提取工艺 SDS-PAGE |
The comparative study on six kinds of extraction methods for membrane proteins of mycoplasma bovis |
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Abstract: | |
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Keywords: | mycoplasma bovis membrane proteins extraction method SDS-PAGE |
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