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| 猪链球菌2型重组suilysin的高效表达及其生物学特性 | |
| 引用本文： | 陈正涛,颜世敢,张秀美,张琳,杨少华,许传田,胡北侠,郝明飞,李建亮.猪链球菌2型重组suilysin的高效表达及其生物学特性[J].中国兽医学报,2013,33(6). |
| 作者姓名： | 陈正涛 颜世敢 张秀美 张琳 杨少华 许传田 胡北侠 郝明飞 李建亮 |
| 作者单位： | 1. 山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018;山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防控与繁育重点实验室,山东济南250100 2. 山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省禽疫病防控与繁育重点实验室,山东济南250100;山东大学农学院,山东济南250100 3. 山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防控与繁育重点实验室,山东济南,250100 4. 山东农业大学动物科技学院,山东泰安,271018 |
| 基金项目： | 山东省优秀中青年科学家奖励基金 |
| 摘 要： | 根据猪链球菌2型(SS2)HA9801株溶血素(suilysin,SLY)基因全长序列设计引物,扩增SLY基因,与原核表达载体pET-28a连接,转入大肠杆菌Transetta (DE3)中诱导表达,收集表达菌体,超声破壁、镍柱纯化获得可溶性rSLY蛋白,电泳鉴定后测定rSLY的溶血活性及其溶血谱,系统研究温度、酸碱度、离子强度等理化因素对rSLY溶血活性的影响.结果表明,本试验建立的rSLY原核表达体系能高效可溶性表达具有溶血活性的rSLY,纯度达电泳纯,相对分子质量为54 000左右,100 mL菌液诱导后能纯化出约8 mg电泳纯的rSLY.rSLY具有高溶血活性,溶血比活为4 057 HU/mg.rSLY对多种动物的红细胞有溶血作用,其中对猪、兔和豚鼠的作用最强.rSLY在4℃保存时溶血活性最稳定,保存48h后溶血活性不降低.在pH 6～7和离子强度为500 mmol/L时溶血活性最高.本试验获得了高表达、可溶性、高溶血活性的rSLY,首次系统研究了不同理化因素对rSLY生物学活性的影响,为SLY致病机理深入研究及SS2亚单位疫苗和诊断试剂的研制奠定了基础. |
| 关 键 词： | 猪链球菌2型 溶血素 重组溶血素 原核表达 溶血活性 |
High-efficient expression of soluble recombinant suilysin of Streptococcus suis serotype 2 and its biological characteristics |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Streptococcus suis serotype 2 suilysin recombinant suilysin prokaryotic expression hemolytic activity |
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