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奶牛S100A12基因克隆、原核表达及体外抗菌活性分析
引用本文:曹随忠,雍康,姚学萍,崔亚飞,杨德英,余树民,刘宗平.奶牛S100A12基因克隆、原核表达及体外抗菌活性分析[J].中国兽医学报,2013,33(6).
作者姓名:曹随忠  雍康  姚学萍  崔亚飞  杨德英  余树民  刘宗平
作者单位:1. 四川农业大学动物医学院,四川雅安625014;扬州大学兽医学院,江苏扬州225009
2. 四川农业大学动物医学院,四川雅安,625014
3. 扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009
基金项目:中国博士后科学基金资助项目,四川省教育厅青年基金项目
摘    要:克隆奶牛S100A12基因并在大肠杆菌中高效表达.采用RT-PCR扩增奶牛外周血白细胞中S100A12基因,构建原核表达载体pCold TF-S100A12,在大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达并纯化.SDS-PAGE和Westernblotting分析显示S100A12基因以融合蛋白形式表达,表达量占菌体总蛋白的46.7%,纯化的重组蛋白(80 mg/L).琼脂扩散法测定重组蛋白对乳腺炎主要致病菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性.结果显示:重组蛋白对大肠杆菌有抗菌活性,而对金黄色葡萄球菌无抗菌活性.本研究为S100A12蛋白抗体制备及基因功能研究奠定了基础.

关 键 词:奶牛  乳房炎  S100A12基因  原核表达  抗菌活性

Cloning and expression of cDNA of S100A12 from Holstein cow and its antibacterial activity
Abstract:
Keywords:dairy cattle  mastitis  S100A12 gene  prokaryotic expression  antibacterial activity
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