鸭瘟病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法的建立与应用 |
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引用本文: | 张坤,刁有祥,鞠小军.鸭瘟病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法的建立与应用[J].中国兽医学报,2013,33(4). |
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作者姓名: | 张坤 刁有祥 鞠小军 |
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作者单位: | 山东农业大学动物科技学院,山东泰安,271018 |
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基金项目: | 现代农业产业技术体系专项资金资助 |
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摘 要: | 为建立一种简便、快速、灵敏、特异的鸭瘟病毒(DPV)检测方法,本研究根据GenBank中登录的DPV基因组序列,设计3对特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,经优化反应体系,建立了LAMP快速检测方法.结果表明,LAMP方法能够在63℃恒温下,1h内实现目的核酸的大量扩增.结果判定时只需要在扩增产物中加入SYBRGreen Ⅰ染料,就可以直接在可见光或紫外光下观察颜色变化.该方法敏感性可达0.245 μg/L,比普通PCR灵敏性高10倍;对鸭病毒性肝炎病毒、H9N2亚型禽流感病毒、鸭副黏病毒、鸭源偏肺病毒等的核酸无交叉反应;利用建立的LAMP检测方法对40份临床样品的阳性检出率为30%.该方法简便快捷,省时省力,是一种适用于基层实验室快速、准确检测DPV的方法.
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关 键 词: | 鸭瘟病毒(DPV) 环介导等温扩增技术(LAMP) |
Development of a loop-mediated isothermal amplification assay for the rapid detection of duck plague virus |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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