| 猪源铁蛋白重链亚基纳米粒的制备 |
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| 引用本文： | 李滨洲,和春昊,吴秋玲,郭珍珍,张留君,杨国宇,王亚宾,陈丽颖.猪源铁蛋白重链亚基纳米粒的制备[J].河南农业大学学报,2018(3). |
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| 作者姓名： | 李滨洲 和春昊 吴秋玲 郭珍珍 张留君 杨国宇 王亚宾 陈丽颖 |
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| 作者单位： | 河南农业大学牧医工程学院;河南省动物性食品安全重点实验室 |
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| 摘 要： | 根据Gen Bank公布的铁蛋白重链基因序列,设计出1对特异性引物;提取猪心脏总RNA,采用RT-PCR方法扩增出铁蛋白重链亚基基因片段,经测序正确后,再将双酶切的纯化产物与PET32a原核表达载体相连接,构建重组质粒、把测序正确的重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达。将表达的重组蛋白用Ni~+离子亲和层析柱纯化后,用SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化的表达产物。将鉴定正确的铁蛋白产物置于透射电镜下观察其表征,以进一步鉴定铁蛋白纳米颗粒是否自组装成功。结果表明,本研究成功表达并纯化出了猪源铁蛋白重链亚基,而透射电镜下观察到了大量直径为10~13 nm的颗粒,说明重组猪源铁蛋白重链纳米粒自组装成功。
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