马铃薯Y病毒衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备 |
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引用本文: | 王玉,黄显德,魏代福,温亮,杨举田,陈秀斋,田延平.马铃薯Y病毒衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备[J].山东农业科学,2018(1). |
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作者姓名: | 王玉 黄显德 魏代福 温亮 杨举田 陈秀斋 田延平 |
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作者单位: | 山东农业大学植物保护学院;山东省农业微生物重点实验室;临沂市烟草公司; |
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摘 要: | 采用RT-PCR方法扩增马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,将其连接到原核表达载体pEHISTEV上,获得重组质粒pEHISTEV-PVY-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,可以表达出分子量为35 k D的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,免疫新西兰大耳兔制备PVY CP抗血清。间接ELISA结果表明,该抗血清的效价为1∶16384,Western blot分析表明该抗血清只与感染PVY的普通烟植株有特异性反应,而与健康普通烟和感染PVX的普通烟植株无反应。本研究为PVY的血清学检测以及早期预警奠定了基础。
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