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检测猪瘟病毒野毒株胶体金免疫层析方法的建立
引用本文:王向鹏,孙元,杨增岐,仇华吉.检测猪瘟病毒野毒株胶体金免疫层析方法的建立[J].中国预防兽医学报,2010,32(6).
作者姓名:王向鹏  孙元  杨增岐  仇华吉
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;西北农林科技大学动物医学院,陕西,杨凌,712100
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001
3. 西北农林科技大学动物医学院,陕西,杨凌,712100
摘    要:为建立快速、简便检测猪瘟病毒(CSFV)野毒的胶体金免疫层析方法(GICA),本研究采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗CSFVE2蛋白的单克隆抗体(MAb)6E10作为捕捉抗体,将纯化的抗CSFVE2蛋白的MAbHQ06和兔抗鼠IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,优化反应条件,组装成胶体金免疫层析试纸条。结果表明,所制备的试纸条用于检测CSFV野毒感染的PK-15细胞培养物,在检测线和质控线处均呈现红色条带,健康PK-15细胞培养物对照仅在质控线呈现红色条带;试纸条检出病毒培养物的最低限为103.5 TCID50;用不同批次的试纸条重复检测,结果无差异;该试纸条不与猪瘟兔化弱毒(HCLV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PRV)、伪狂犬病病毒(PrV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)反应。所制备的试纸条具有良好的特异性、敏感性和重复性,初步达到了区分检测CSFV野毒株和弱毒株的目的。

关 键 词:猪瘟病毒  野毒株  胶体金  免疫层析

Development of a colloidal gold immunochromatographic assay for antigen detection of wild-type classical swine fever virus
WANG Xiang-peng,SUN Yuan,YANG Zeng-qi,QIU Hua-ji.Development of a colloidal gold immunochromatographic assay for antigen detection of wild-type classical swine fever virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(6).
Authors:WANG Xiang-peng  SUN Yuan  YANG Zeng-qi  QIU Hua-ji
Abstract:
Keywords:
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