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茄子低温响应基因SmICE1的克隆及其功能分析
引用本文:周露,刘杨,崔群香,陈火英.茄子低温响应基因SmICE1的克隆及其功能分析[J].南京农业大学学报,2022(2):244-253.
作者姓名:周露  刘杨  崔群香  陈火英
作者单位:1. 金陵科技学院园艺园林学院;2. 上海交通大学农业与生物学院
摘    要:目的]本文旨在探索茄子SmICE1(Inducer of CBF expression 1)基因在低温响应和花青素合成途径中的功能。方法]以光敏型茄子品种‘蓝山禾线’为材料,通过同源克隆获得SmICE1基因的全长序列,并对其进行生物信息学分析;4℃低温处理4叶期的茄子幼苗,分析SmICE1基因的表达水平;构建植物表达载体PHB-SmICE1-YFP,通过农杆菌介导法在烟草叶片中进行瞬时转化,研究SmICE1蛋白的亚细胞定位;通过农杆菌蘸花法在拟南芥中过表达SmICE1基因,分析转基因植株的耐寒性、生理指标及AtCBF(CRT binding factor)基因表达情况;将PHB-SmICE1-YFP农杆菌和SmCBFpro-LUC农杆菌菌液瞬时共转入烟草细胞中进行双荧光素酶试验;构建诱饵载体SmYABBY-pGBKT7和猎物载体SmICE1-pGADT7转化至酵母感受态AH109中进行酵母双杂交试验;构建植物表达载体SmYABBY-nYFP和SmICE1-cYFP,利用注射法将其农杆菌转化至烟草细胞中进行双分子荧光互补试验。结果]克隆获得茄子SmICE1基因,其含有1 524 b...

关 键 词:茄子  SmICE1  基因克隆  低温响应  功能分析  花青素
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