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菜心ISSR-PCR反应体系的优化
引用本文:孙雪梅,乔爱民,孙敏,桂腾琴.菜心ISSR-PCR反应体系的优化[J].西南农业大学学报,2007,29(10):129-133.
作者姓名:孙雪梅  乔爱民  孙敏  桂腾琴
作者单位:[1]西南大学生命科学学院,重庆400715 [2]仲恺农业技术学院农业与园林学院,广州510225
基金项目:广东省自然科学基金资助项目(B1010412).
摘    要:以菜心(Brassica campestris L.ssp.Chinensis Var.utilis Tssen.et Lee.)为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如Mg^2+、Taq DNA聚合酶、dNTPs、Primer、模版DNA的浓度及引物退火温度、延伸时间和循环次数进行了探讨,确立了适合菜心ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数:在25pL反应体系中含10×buffer 2.5μL,2.0mmol/LMg^2+,0.5U Taq DNA聚合酶,0.2mmol/LdNTPs,0.5μmol/L引物,30ng模板DNA.PCR扩增程序:94℃预变性3min;94℃变性1min,49.7~56℃退火(退火温度随引物不同而定)1min,72℃延伸45s,40个循环;72℃延伸5min.

关 键 词:菜心  简单序列重复间区(ISSR)  反应体系
文章编号:1673-9868(2007)10-0129-05
修稿时间:2007-04-03

Optimization of an ISSR-PCR Reaction System in Flowering Chinese Cabbage
SUN Xue-mei, QIAO Ai-min, SUN Min, GUI Teng-qin.Optimization of an ISSR-PCR Reaction System in Flowering Chinese Cabbage[J].Journal of Southwest Agricultural University,2007,29(10):129-133.
Authors:SUN Xue-mei  QIAO Ai-min  SUN Min  GUI Teng-qin
Institution:Schoolof Life Science, Southwest University, Chongqing 400715, China; College of Agriculture and Landscape Architecture, Zhongkai University of Agriculture and Technology , Guangzhou 510225, China
Abstract:
Keywords:Brassica campestris L  ssp  Chinensis var  utilis Tssen  et Lee    ISSR  reaction system
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