| 猪瘟流行毒株E0蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立 |
| |
| 引用本文： | 李 鹏,张彦明,张 志.猪瘟流行毒株E0蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(10):24-28. |
| |
| 作者姓名： | 李 鹏 张彦明 张 志 |
| |
| 作者单位： | [1]西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100 [2]中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266032 |
| |
| 基金项目： | 农业部动物疫情防制与监测项目 |
| |
| 摘 要： | 【目的】表达猪瘟保护性抗原E0蛋白,用以建立猪瘟抗体检测方法,为进一步开发诊断试剂盒和研究E0蛋白的免疫学功能奠定基础。【方法】将猪瘟野毒株FJ237-E0基因插入原核表达载体pET32a中,以BL21(DE3)为表达菌株进行诱导表达,将表达的重组蛋白通过His亲和层析柱进行纯化,以纯化的His-E0融合蛋白作为诊断抗原,通过探索抗原包被量和抗体血清稀释倍数,建立检测猪瘟E0抗体的ELISA方法。【结果】成功克隆了CSFV E0基因,其核苷酸序列为687 bp,编码229个氨基酸。经His亲和层析柱纯化检测纯度为0.587 mg/mL;SDS-PAGE电泳结果显示,表达的E0蛋白分子质量约为50.3 ku,表达的重组蛋白为可溶性蛋白,表达量占菌体总蛋白的30%;ELISA方阵确定的最佳抗原包被量为100 ng,血清稀释倍数为1∶30,建立的ELISA方法与IDEXX公司猪瘟病毒抗体检测试剂盒的阳性符合率为92.3%,阴性符合率为85.7%。【结论】建立的ELISA检测方法,不但为猪瘟抗体监测提供了一种比较实用的血清学监测手段,也为进一步开发猪瘟抗体检测试剂盒奠定了基础。
|
| 关 键 词： | E0基因 原核表达 间接ELISA |
| 收稿时间： | 2007/10/23 0:00:00 |
Prokaryotic expression of CSFV E0 protein and establishment of an indirect ELISA for detection of antibody |
| |
| LI Peng,ZHANG Yan-ming,ZHANG Zhi,LI Xiao-cheng,WANG Jing-yu,ZHANG Yan-xia.Prokaryotic expression of CSFV E0 protein and establishment of an indirect ELISA for detection of antibody[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(10):24-28. |
| |
| Authors: | LI Peng ZHANG Yan-ming ZHANG Zhi LI Xiao-cheng WANG Jing-yu ZHANG Yan-xia |
| |
| Institution: | 1 College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China;2 China Animal Health and Epidemiology Centre,Qingdao,Shandong 266032,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》下载免费的PDF全文 |
|
