| SYBR Green I荧光定量PCR检测类猪圆环病毒因子P1 |
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| 引用本文： | 温立斌,何孔旺,杨汉春,郭容利,周俊明,钟书霖.SYBR Green I荧光定量PCR检测类猪圆环病毒因子P1[J].华北农学报,2009,24(4). |
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| 作者姓名： | 温立斌 何孔旺 杨汉春 郭容利 周俊明 钟书霖 |
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| 作者单位： | 1. 江苏省农业科学院,兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏,南京,210014
2. 中国农业大学,动物医学院,农业部预防兽医学重点开放实验室,北京,100094 |
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| 基金项目： | 国家"973"计划前期研究专项，江苏省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 该研究旨在建立快速、敏感和特异的检测类猪圆环病毒因子 P1的 SYBR Green I 荧光定量 PCR 法,用于 P1 的早期诊断.以感染 P1 的猪血清DNA提取物为模板,采用 PCR 扩增 P1 101 bp 的基因片段,将其克隆至 pMD18-T 载体,重组质粒测序并进行同源性分析;以阳性质粒为模板,建立 SYBR Green I 荧光定量PCR检测方法,并进行敏感性和特异性检测.经测序证实扩增片段属于 P1,所建立的 SYBR Green I 荧光定量 PCR 检测 P1 的反应在 101 ～108拷贝/μL 之间具有良好的线性关系,反应的检出下限为10拷贝/μL,而对猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等的检测为阴性,表明该方法敏感、特异.成功建立了 SYBR Green I 荧光定量 PCR 检测 P1 载量的方法,为 P1 致病机制和机体免疫保护机制的研究提供了技术平台.
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| 关 键 词： | 类猪圆环病毒因子 荧光定量PCR 熔解曲线 检测 |
Detection of Porcine Circovirus-like Agent P1 Using SYBR Green I Fluorescent Quantitative PCR Assay |
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| WEN Li-bin,HE Kong-wang,YANG Han-chun,GUO Rong-li,ZHOU Jun-ming,ZHONG Shu-lin.Detection of Porcine Circovirus-like Agent P1 Using SYBR Green I Fluorescent Quantitative PCR Assay[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2009,24(4). |
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| Authors: | WEN Li-bin HE Kong-wang YANG Han-chun GUO Rong-li ZHOU Jun-ming ZHONG Shu-lin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | P1 |
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