| 香蕉BBI 型蛋白酶抑制剂（MaBBI1）的诱导、变性和复性 |
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| 引用本文： | 黄司法,唐志敏,杨礼香.香蕉BBI 型蛋白酶抑制剂（MaBBI1）的诱导、变性和复性[J].广东农业科学,2016,43(9):44-50. |
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| 作者姓名： | 黄司法 唐志敏 杨礼香 |
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| 作者单位： | 广州大学生命科学学院,广东广州,510006 |
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| 摘 要： | BBI(Bowman-Birk protease inhibitor)是一种富含半胱氨酸的植物蛋白酶抑制剂,其抑制的蛋白酶主要包括胰蛋白酶、糜蛋白酶和弹性蛋白酶等丝氨酸蛋白酶。以从香蕉(Musa acuminata L.cv.Brazilian)根中提取的总RNA逆转录成的c DNA为模板,根据NCBI公布的野生型马来西亚蕉(Musa acuminata subsp.Malaccensis)BBI基因(收录号:XM_009415512)的序列设计引物,克隆了1个BBI型蛋白酶抑制剂基因(MaBBI1)。MaBBI1基因大小为381 bp,编码126个氨基酸,包括12个半胱氨酸(9.5%),将该基因构建到载体p GEX-6P-1上转化大肠杆菌Rossetta菌株进行重组蛋白GST-MaBBI1的诱导表达。在IPTG诱导3 h后,一个预测分子量为40.8953 ku的GST-MaBBI1融合蛋白被大量表达。IPTG诱导后的GST-MaBBI1融合蛋白是不溶的并累积成包涵体,通过对包涵体进行变性和复性的方法得到可溶的GST-MaBBI1融合蛋白,为进一步在体外研究该蛋白的功能奠定基础。
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| 关 键 词： | 香蕉 Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI) 诱导 变性 复性 |
Induction,denaturation and renaturation of Musa acuminata Bowman-Birk type protease inhibitor (MaBBI1) |
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