| 日本鳗鲡TRAF3基因的克隆及功能研究 |
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| 引用本文： | 凌露露,梁英,黄文树,聂品,黄贝.日本鳗鲡TRAF3基因的克隆及功能研究[J].水产学报,2023,47(8):089414-089414. |
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| 作者姓名： | 凌露露 梁英 黄文树 聂品 黄贝 |
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| 作者单位： | 集美大学水产学院，福建 厦门 361021;集美大学水产学院，福建 厦门 361021;广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室，广东 湛江 524088;集美大学水产学院，福建 厦门 361021;鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心，福建 厦门 361021;青岛农业大学海洋科学与工程学院，山东 青岛 266237 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(32073011)；厦门市自然科学基金(3502Z20206022)；福建省自然科学基金(2020J01666)；广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室开放基金(PBEA2021ZD05) |
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| 摘 要： | 为探究鱼类TRAF3在鱼类抗病毒免疫应答中的功能及作用机制，实验利用逆转录PCR克隆获得了日本鳗鲡TRAF3转录本 (AjTRAF3)，利用生物信息学软件分析了AjTRAF3的结构特征，利用实时荧光定量 PCR(qPCR)、双荧光素酶报告系统以及免疫共沉淀等方法对其表达规律、功能及作用机理进行了初步分析。AjTRAF3的开放阅读框长度为1 707 bp，编码568个氨基酸。序列结构分析结果显示，AjTRAF3由N端的环结构域2个锌指结构域以及1个螺旋结构域和C端高度保守的TRAF-C (MATH)结构域组成。qPCR结果显示，AjTRAF3在日本鳗鲡各组织中均有表达，脑组织中表达量最高，其次为头肾，心脏中的表达量最低。Poly I:C刺激6 h后，日本鳗鲡脾脏组织中AjTRAF3上调倍数最高，为对照组的15.83倍。迟缓爱德华氏菌感染24 h后，日本鳗鲡脾脏组织中AjTRAF3上调倍数最高，为对照组的31.47倍。此外，本研究构建了AjTRAF3真核表达质粒，发现过表达AjTRAF3能显著上调炎症及抗病毒相关基因的表达，可显著增强AjIFN2、AjIFN4和NF-κB启动子荧光素酶活性。并能显著上调由AjRIG-IN、AjMAVS、AjIRF3诱导的AjIFN2、AjIFN4和NF-κB启动子活性。免疫荧光结果显示，AjTRAF3主要定位于细胞质中，且与AjMAVS存在共定位。免疫共沉淀结果显示，AjTRAF3通过MATH结构域与AjMAVS相互结合，缺失该结构域后，其与AjMAVS的相互作用消失，推测AjTRAF3可通过介导RIG-I/MAVS信号转导途径调控鱼类的抗病毒免疫应答。本研究结果为进一步揭示鱼类TRAF3的生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 日本鳗鲡 TRAF3 MAVS 共定位 启动子 |
| 收稿时间： | 2022/8/3 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2022/11/22 0:00:00 |
Identification and functional characterization of TRAF3 in Japanese eel (Anguilla japonica) |
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| LING Lulu,LIANG Ying,HUANG Wenshu,NIE Pin,HUANG Bei.Identification and functional characterization of TRAF3 in Japanese eel (Anguilla japonica)[J].Journal of Fisheries of China,2023,47(8):089414-089414. |
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| Authors: | LING Lulu LIANG Ying HUANG Wenshu NIE Pin HUANG Bei |
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| Institution: | College of Fisheries, Jimei University, Xiamen 361021, China;College of Fisheries, Jimei University, Xiamen 361021, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Aquatic Animal Disease Control and Healthy Culture, Zhanjiang 524088, China;College of Fisheries, Jimei University, Xiamen 361021, China;Engineering Research Center of the Modern Industry Technology for Eel, Ministry of Education, Xiamen 361021, China;School of Marine Science and Engineering, Qingdao Agricultural University, Qingdao 266237, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Anguilla japonica TRAF3 MAVS co-localization promoter |
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