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| 甘蔗eEF1A反义表达载体构建及其遗传转化研究 | |
| 引用本文： | 覃迎姿,王爱勤,黄文静,杨丽涛,李杨瑞.甘蔗eEF1A反义表达载体构建及其遗传转化研究[J].西南农业学报,2009,22(3). |
| 作者姓名： | 覃迎姿 王爱勤 黄文静 杨丽涛 李杨瑞 |
| 作者单位： | 1. 广西大学农学院,广西,南宁,530005 2. 广西大学农学院,广西,南宁,530005;广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,广西,南宁,530007;中国农业科学院甘蔗研究中心,广西,南宁,530007 3. 广西大学农学院,广西,南宁,530005;中国农业科学院甘蔗研究中心,广西,南宁,530007 4. 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,广西,南宁,530007;中国农业科学院甘蔗研究中心,广西,南宁,530007 |
| 基金项目： | 国家科技支撑计划重点项目，广西科技攻关重点项目，广西农业科学院博士后基金 |
| 摘 要： | 延伸因子eEF1A(Eukaryotic elongation factor 1A)是在核糖体催化氨基酸链延伸以及推动、控制蛋白质合成过程中起重要作用的蛋白质因子.利用RT-PCR技术扩增得到甘蔗eEF1A的编码区1420 bp的cDNA序列,反向连接到受体质粒pBI121载体中,构建含GUS基因的甘蔗eEF1A基因反义植物表达载体pBIantiEF.用冻融法将pBIantiEF导入根癌农杆菌菌株EHA105中,通过农杆菌介导法,将eEF1A反义基因转化烟草K346.将获得的43株抗卡那霉素烟草经PCR筛选,得到38株呈阳性的反义转基因植株,阳性植株再经Dot-Southern杂交检测,证明eEF1A基因已整合进其中的34株烟草基因组中,平均转化率为79 %.反义转基因烟草植株移栽后表型出现不同程度的变异,叶片变厚,卷曲不能平展,叶背出现明显皱折,并外突成芽,茎、叶的伸长明显受阻,顶芽出现双芽,开花延迟.推测甘蔗延伸因子eEF1A可能与甘蔗茎、叶伸长生长和发育有关. |
| 关 键 词： | 甘蔗 反义转基因 遗传转化 |
Construction of Plant Expression Vector and Transformation of sugarcane with eEF1A Antisense Gene |
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| QIN Ying-zi,WANG Ai-qin,HUANG Wen-jing,YANG Li-tao,LI Yang-rui.Construction of Plant Expression Vector and Transformation of sugarcane with eEF1A Antisense Gene[J].Southwest China Journal of Agricultural Sciences,2009,22(3). | |
| Authors: | QIN Ying-zi WANG Ai-qin HUANG Wen-jing YANG Li-tao LI Yang-rui |
| Abstract: | |
| Keywords: | eEF1A |
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