| 马蔺ISSR-PCR反应体系的建立与优化 |
| |
| 引用本文： | 王康,董宽虎,孙彦,康俊梅,董洁,孟林.马蔺ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].草地学报,2008,16(6):580. |
| |
| 作者姓名： | 王康 董宽虎 孙彦 康俊梅 董洁 孟林 |
| |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京, 100193;2. 山西农业大学动物科技学院, 太谷, 山西, 030801;3. 中国农业大学动物科技学院草地研究所, 北京, 100193;4. 北京市农林科学院草业与环境发展中心, 北京, 100097 |
| |
| 基金项目： | 北京市自然科学基金，科研院所基本科研业务费专项基金创新团队项目 |
| |
| 摘 要： | 根据正交试验设计原理,设计探索正交试验和细调正交试验以确定马蔺(Iris lacteal Pall.var.chinensis(Fisch.)Koidz)ISSR-PCR反应体系中各成分的浓度,从dNTP、Taq酶、Pri mers、Mg2+4种因素对马蔺ISSR反应体系进行了优化,得到适合马蔺的ISSR-PCR最佳反应体系,即25μl的反应体系中含有dNTP 0.3 mmol/L、Taq酶1.5 U、Pri mers 0.4μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L以及1×buffer和50 ng模板DNA。通过对马蔺ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到这条引物的最佳退火温度为52℃。这一体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究马蔺遗传多样性奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 马蔺 ISSR-PCR 反应体系 正交优化 |
| 收稿时间： | 2008-03-10 |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Iris lacteal |
| |
| WANG Kang,DONG Kuan-hu,SUN Yan,KANG Jun-mei,DONG Jie,MENG Lin.Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Iris lacteal[J].Acta Agrestia Sinica,2008,16(6):580. |
| |
| Authors: | WANG Kang DONG Kuan-hu SUN Yan KANG Jun-mei DONG Jie MENG Lin |
| |
| Institution: | 1. Institute of Animal Sciences, CAAS, Beijing 100193, China;2. School of Animal Science, Shanxi Agricultural University, Taigu, Shanxi 030801, China;3. Institute of Grassland Science, China Agricultural University, Beijing 100193, China;4. Beijing Research Development Center for Grass and Environment, BAAFSR Beijing 100097, China |
| |
| Abstract: | In this paper,two orthogonal experiments were conducted to optimize ISSR amplification system of Iris lacteal Pall.var.chinensis(Fisch.) Koidz.Results show that the optimum concentrations of reactants in 25 μl reaction mixture were as follows: dNTP 0.3 mmol/L,Taq DNA polymerase 1.5 U,Primers 0.4 μmol/L,Mg2+ 2.5mmol/L,1×buffer and 50 ng template DNA.The optimal annealing temperature of this primer was proposed by gradient PCR at 52℃ for ISSR-PCR reaction.The result provided a standardized ISSR-PCR program for the analysis of genetic diversity of I.lacteal var.chinensis. |
| |
| Keywords: | Iris lacteal Pall var chinensis(Fisch ) Koidz ISSR-PCR Reaction system Orthogonal optimization |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《草地学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《草地学报》下载免费的PDF全文 |
|
