| 鸭圆环病毒ORF3蛋白多克隆抗体的制备与应用 |
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| 引用本文： | 李浩然,武专昌,刘会会,朱晓慧,韩旭,张冉,张国良,夏小静,王鑫.鸭圆环病毒ORF3蛋白多克隆抗体的制备与应用[J].水禽世界,2019(3). |
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| 作者姓名： | 李浩然 武专昌 刘会会 朱晓慧 韩旭 张冉 张国良 夏小静 王鑫 |
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| 作者单位： | 临沂大学农林科学学院;河南科技学院 |
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| 摘 要： | 鸭圆环病毒(DuCV)感染引起淋巴细胞凋亡,其ORF3蛋白是唯一具有凋亡活性的病毒蛋白,但目前ORF3特异性抗体的缺乏限制了其生物学功能的深入研究。DuCV包含基因I型和基因II型两种基因型,利用软件分析两基因型ORF3同源性,选取保守性肽段进行多肽合成,并与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联,多次加强免疫兔子,采集血清并纯化IgG后制备ORF3多克隆抗体。ELISA检测发现此抗体能特异性与ORF3保守肽段反应,并具有较高的效价,间接免疫荧光(IFA)显示此抗体能特异性识别两基因型ORF3蛋白,但并不能用于western blot检测,说明此多抗主要识别ORF3空间构象的表位。总之,我们成功制备了特异性识别两种基因型DuCV ORF3蛋白的抗体,为今后深入探究DuCV ORF3蛋白的生物学功能提供了良好的研究工具。
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